組織原位ALP染色試劑盒
貨號(hào)（Cat.）：CB2307 保存（Store）：避光，-20℃ 規(guī)格：100T 價(jià)格：300元
原理介紹：
堿性磷酸酶(ALP)在哺乳動(dòng)物中主要存在于肝臟、骨骼和腎臟。成骨細(xì)胞能夠分泌堿性磷酸酶，是骨形成所必需的酶，是成骨細(xì)胞分化和功能成熟的早期標(biāo)志。了解骨代謝狀態(tài)是研究細(xì)胞生理活性的一個(gè)有效方法。對(duì)ALP染色后可了解成骨細(xì)胞的骨形成情況，其原理是采用偶氮偶聯(lián)法，在pH9.2~9.8的堿性條件下，細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶可使AS-BI磷酸鹽水解，釋放出的磷酸萘酚，不偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。
適用于：骨細(xì)胞涂片、骨組織冰凍切片、骨組織石碏切片等，觀察成骨細(xì)胞的染色結(jié)果，檢查細(xì)胞的分化狀態(tài)和骨組織的分布情況。僅供研究，不得用于診斷。
試劑盒組分：
1.核染色試劑··············10 mL（用核染色試劑使各種細(xì)胞核呈藍(lán)綠色。）
2.堿性磷酸酶預(yù)混物溶液····30 mL（ALP染色劑使成骨細(xì)胞的細(xì)胞膜、軟骨細(xì)胞和細(xì)胞間膜呈茶褐色）
樣品前期處理：
注：ALP染色使用不能用福爾馬林固定的新鮮材料，如果未在短時(shí)間內(nèi)固定，會(huì)導(dǎo)致酶失活，因此推薦80%乙醇固定。ALP酶是含有金屬Zn蛋白。通過(guò)脫鈣處理，酶的組成成分Zn被去除，導(dǎo)致酶失活。為彌補(bǔ)此缺點(diǎn)，需要添加ZnSO4，作為ALP活化劑，也可嘗試添加相同螯合劑EDTA溶液，染色結(jié)果會(huì)更好。
實(shí)驗(yàn)步驟：
材料獲取→固定→脫脂脫鈣→脫水、包埋→切片、干燥→染色、封片→鏡檢。
陽(yáng)性結(jié)果判斷：ALP的活性部位呈藍(lán)色或茶褐色；ALP酶活性染色使用的是預(yù)混物溶液，簡(jiǎn)單適用，骨組織切片（脫鈣GMA樹(shù)脂包埋切片）或培養(yǎng)的細(xì)胞。
組織原位TRAP染色試劑盒
貨號(hào)（Cat.）：CB2308 保存（Store）：避光，-20℃ 規(guī)格：100T 300元
產(chǎn)品原理介紹：
抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）為破骨細(xì)胞的特異性標(biāo)志酶，只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中,主要用于檢測(cè)骨、骨細(xì)胞中破骨細(xì)胞的染色，破骨細(xì)胞呈紅色，細(xì)胞核淺藍(lán)色。TRAP分布廣，遍布各種組織，存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，溶酶體標(biāo)志酶。pH為4.5～5.5。血液中的TRAP絕大多數(shù)來(lái)源于破骨細(xì)胞，通過(guò)測(cè)量血液中的TRAP了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r(shí)，細(xì)胞內(nèi)抗酒石酸酸性磷酸酶催化底物水解，生成不溶性的偶氮染料沉淀，用TRAP染色劑使破骨細(xì)胞呈紅色，可檢查細(xì)胞的分化狀態(tài)和骨組織的分布情況。
適用于：新鮮血涂片、細(xì)胞涂片，亦可用于冰凍切片、石蠟切片等。本染色試劑盒適用于生物或藥物研究。僅供研究，不得用于診斷。
試劑盒組分：
1.酒石酸溶液（×10）·······3 mL
2. 酸性磷酸酶底物液A······30 mL
3. 酸性磷酸酶底物液B······3 mL
4. 核染色試劑··············10 mL（用核染色試劑使各種細(xì)胞核呈藍(lán)綠色。）
樣品前期處理：
實(shí)驗(yàn)步驟：
材料獲取→固定→脫脂脫鈣→脫水、包埋→切片、干燥→染色、封片→鏡檢
結(jié)果判斷：以萘酚二磷酸鹽為底物，偶氮副品紅為顯色劑，TRAP在酒石酸鉀鈉存在條件下將萘酚AS-BI磷酸鹽水解為萘酚AS-BI，與顯色劑結(jié)合形成紅色沉淀,定位于細(xì)胞質(zhì)中，若細(xì)胞內(nèi)的ACP有抗酒石酸的活性，則呈陽(yáng)性反應(yīng)。
